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定點條件性基因過表達小鼠
定義:在小鼠特定組織或者器官中,基因進行表達(組織特異性);在小鼠的特定生長時期,基因進行表達(時間特異性)。
原理:利用Cre-LoxP系統對目的基因進行可誘導表達調控。構建Rosa26-(SA/pCAG)-loxp-Stop-loxp-cDNA-pA 重組載體,將條件性過表達結構插入到Rosa26基因intron1中。該類型Knockin小鼠可與各類表達Cre重組酶的工具鼠雜交,獲得組織特異性表達外源基因的條件性過表達小鼠模型。
組織特異性過表達

時間特異性過表達(在他莫昔芬的誘導下,CreERT表現出核酸酶活性)
特點:
(1)可避免隨機整合轉基因模型中多拷貝數、多位點插入、表達不穩定、需要建系等煩惱
(2)可實現外源基因穩定的可調控表達,避免全身性基因過表達可能導致的不可預測的異常表型
(3)可進行超大片段(20-30kb)定點整合
(4)除Rosa26位點以外,另有多個位點可供選用,滿足不同研究需求
(5)可用于基因功能、蛋白功能的過表達研究
(6)可用于KO表型的Rescue實驗
(7)可用于在沒有人同源基因的情況下的人源基因表達模型
(8)可用于人類疾病基因突變