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轉基因小鼠
定義:將特定的外源目的基因轉移到小鼠基因組中,實現外源基因的過表達,使小鼠產生可預期的、定向的遺傳改變。
分類:根據插入位點是否確定,可分為隨機轉基因和定點轉基因
1、隨機轉基因小鼠
制備流程:構建表達載體—>顯微注射受精卵—>胚胎移植假孕母鼠—>鑒定并驗證F0代—>獲得陽性鼠
2、定點轉基因
Rosa26位點是目前最為常用的定點整合位點之一。它位于小鼠6號染色體,是一個非編碼基因,已被證明在大部分組織和細胞中都有表達。表達比較活躍的基因區域因為需要轉錄因子的進入基因組結構不會被異染色質化,因此在這個區域定點插入外源DNA,在各組織中表達的可能性都非常高。所以,Rosa26被廣泛用來作為外源基因表達的安全位點。
特點:
(1)獲得模型唯一,不影響內源性基因表達
(2)遺傳穩定性高
(3)無需篩選分析