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小鼠基因編輯服務

CRISPR-Cas9技術原理：

　　CRISPR（clustered,regularlyinterspaced,shortpalindromicrepeats）是一種來自細菌降解入侵的病毒DNA或其他外源DNA的免疫機制。在細菌及古細菌中，CRISPR系統共分成3類，其中Ⅰ類和Ⅲ類需要多種CRISPR相關蛋白（Cas蛋白）共同發揮作用，而Ⅱ類系統只需要一種Cas蛋白即可，這為其能夠廣泛應用提供了便利條件。

　　目前，來自Streptococcuspyogenes的CRISPR-Cas9系統應用最為廣泛。Cas9蛋白（含有兩個核酸酶結構域），可以分別切割DNA兩條單鏈。Cas9首先與crRNA及tracrRNA結合成復合物，然后通過PAM序列結合并侵入DNA，形成RNA-DNA復合結構，進而對目的DNA雙鏈進行切割，使DNA雙鏈斷裂。

　　由于PAM序列結構簡單（5'-NGG-3’），幾乎可以在所有的基因中找到大量靶點，因此得到廣泛的應用。CRISPR-Cas9系統已經成功應用于植物、細菌、酵母、魚類及哺乳動物細胞，是目前最高效的基因組編輯系統。

　　CRISPR-Cas9技術優勢：

　　1.效率高：可精確編輯基因組，敲除效率高

　　2.周期短：CRISPR-Cas9系統的構建和使用極為方便，極大降低了實驗難度，縮短實驗周期

　　3.高嵌合率，生殖遺傳穩定；

　　4.多重編輯能力：可實現多個靶位點同時進行基因打靶；

　　5.可實現大片段DNA敲除、敲入、條件性敲除。