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Pull down
一、技術簡介
在Pull down實驗中,帶有標簽的誘餌蛋白被特異結合該標簽的固相化親和配基捕獲,產生“次級親和支持物”,用于純化與誘餌蛋白相互作用的其他蛋白。固相化誘餌蛋白的次級親和支持物可以與含有推測獵物蛋白的各種蛋白樣品相互孵育,如果緩沖液及樣品條件與靶結合相互作用兼容,且誘餌蛋白在帶有標簽和被固相化時仍然可以行使功能,那么存在于樣品中的獵物蛋白就會結合到親和支持物上,“誘餌-獵物復合體”可從支持物上洗脫下來。
二、實驗流程