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案例展示
誘發性案例展示二
裸鼠成瘤
研究背景及目的:
腫瘤是指人體在各種致瘤因子的作用下局部組織細胞異常增生所形成的新生物。腫瘤發生的原因至今仍未完全清楚,與遺傳、環境、飲食、基因突變等都有一定的關系。早期腫瘤的癥狀并不明顯,隨著病情進展可以出現局部腫塊,可以出現疼痛、破潰、出血、感染、梗阻、轉移等并發癥,嚴重者可以危及生命,特別是惡性腫瘤,對于人們的身體健康更是影響極大。腫瘤的治療以手術切除為主,惡性腫瘤還需要根據情況進行放射治療、化療、內分泌治療、靶向治療等綜合治療?,F今社會腫瘤病發率越來越高,種類也是各種各樣,且治療難度較大,為了更深入的了解各種腫瘤的特異性和治療途徑,前期一般選用模型動物小鼠。
實驗對象:選用C57小鼠或免疫缺陷的裸鼠
實驗方式:一種是腫瘤細胞皮下成瘤模型 ,一種人源腫瘤組織來源原位移植瘤動物模型
皮下成瘤實驗方法:
取對數生長的細胞,取處于對數生長期的細胞,細胞達80-90%左右密度為宜,胰酶消化細胞后用預冷的PBS洗兩遍,目的為去除細胞中的血清。用PBS或者無血清培養基吹打細胞沉淀至合適的濃度,一般皮下瘤接種的細胞量為1-5×10^6個細胞/支,接種體積為0.1ml,因此細胞懸液的濃度為1-5×10^7個細胞/ml。
結果測定:
宏觀檢測;一般一周左右開始成瘤,可肉眼觀察或手指觸摸,用游標卡尺測量直徑計算體積。
微觀檢測:可在細胞中加入熒光素酶,后期通過小動物活體成像,觀察想要的指標
腫瘤取材;根據具體的實驗目的取材腫瘤或生成腫瘤后小鼠的部分組織或者血液,做相關的病理學檢測,和蛋白檢測,如切片,血常規,免疫熒光,WB,QPCR等
活體成像